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非洲綠猴腎細胞;VERO-76
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  非洲綠猴腎細胞;VERO-76的詳細資料:

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產品名稱

非洲綠猴腎細胞;VERO-76

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63451

細胞名稱  非洲綠猴腎細胞;VERO-76
形態特性: 上皮樣細胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 為VERO細胞的一個亞。

培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

傳代方法: 1:8,4-5天一次

傳代情況:

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
?
產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
培養操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
rrEGF, CF (100 UG)細胞名稱: 人T淋巴瘤細胞;HUT102 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrEGF (100 UG)細胞名稱: 人B淋巴細胞;WIL2-S[WIL2S] RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rReg IIIa MAb (Cl 250802) (500 UG)細胞名稱: 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)胎牛血清,10%

rReg IIIa Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: 抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤細胞株;MP-H5 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rReg IIIa Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 抗副甲型沙門氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株;PaSh-D3D7 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rReg 2 MAb (Cl 293523) (100 UG)細胞名稱: 抗單克隆抗體雜交瘤細胞株;PenS-4C1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rReg 2 Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: 抗克羅特羅素單克隆抗體雜交瘤細胞株;CL DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rReg 2 Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)胎牛血清,10%

rrDLL1/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrDkk-1, CF (10 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swissalbino DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrDkk-1 (10 UG)細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrCystatin C, CF (10 UG)細胞名稱: 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrCXCL7/TCK-1, CF (25 UG)細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8.653 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrCXCL7/TCK-1 (25 UG)細胞名稱: 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-) DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrCXCL5/LIX, CF (25 UG)細胞名稱: 豚鼠胚胎細胞;104C1 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrCXCL5/LIX (25 UG)細胞名稱: 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%
非洲綠猴腎細胞;VERO-76人花生四烯5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒LFA-3ELISAKit產品規格:48T/96T。

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17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒LHELISAKit產品規格:48T/96T。

產品相關關鍵字: 非洲綠猴腎細胞 VERO-76
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