運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
伊氏李斯特菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Listeria ivanovii | EY00P9073 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL陽性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽性對(duì)照（用第4號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照，并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五人參皂苷Rb3(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione
萘啶酮酸；人參皂苷Rc(標(biāo)準(zhǔn)品) Dibenz[a,h]anthracene
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元人參皂苷Rd(標(biāo)準(zhǔn)品) Dibenzo[b,def]chrysene
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元人參皂苷Rd2(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,2:8,9-Dibenzopentacene
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元人參皂苷Re(標(biāo)準(zhǔn)品) Dibenzo[g,p]chrysene
溴化乙錠(EB)人參皂苷Rf(標(biāo)準(zhǔn)品) Isoviolanthrone
溴化乙錠(EB)人參皂苷Rg1(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
貝西沙星鹽酸鹽人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品) Naphtho[2,3-a]pyrene
貝西沙星鹽酸鹽人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Chlorophenothiazine
貝西沙星鹽酸鹽人參皂苷Rh3(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
甜菜堿（標(biāo)準(zhǔn)品）人參皂苷Rh7(標(biāo)準(zhǔn)品) Indanthrone
甜菜堿人參皂苷Rh8(標(biāo)準(zhǔn)品) Julolidine
甜菜堿人參皂苷Rk1（標(biāo)準(zhǔn)品） 9-Julolidinecarboxaldehyde
尿酸人參皂苷Rk2(標(biāo)準(zhǔn)品) 9,10-Phenanthrenequinone
尿酸人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenanthridine
伊氏李斯特菌探針法PCR熒光定量試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)達(dá)比加群 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 500ML
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)達(dá)比加群 質(zhì)量規(guī)格：>98,BR500ML
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)達(dá)比加群 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
D-二聚體(D2D)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
簇集蛋白(CLU)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定500ML
成纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-阿拉伯糖 質(zhì)量規(guī)格：>99%500ML
血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-阿拉伯糖 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品500ML
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服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 不動(dòng)桿菌屬通用探針法PCR熒光定量試劑盒 |
英文名稱 | Acinetobacter spp. |
貨號(hào) | EY00P8637 |
它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
熒光定量PCR服務(wù)：
公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求：
（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。
2-甲氧基-6-羧酸甲酯吡三聚GC-MS分析試劑盒 MELAMINE GC-MS ANALYSIS KIT(P) Canertinib 2HCl
2-甲基-7-氮雜吲哚三聚相關(guān)類似物標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 MELAMINE RELATED ANALOGS STANDARDS KIT(P) Capecitabine
4-(二氟溴甲基)溴苯山竹果標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 MANGOSTEEN STANDARDS KIT(P) Capecitabine
N-甲基四氫-2H-吡喃-4-山竹果標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 MANGOSTEEN STANDARDS KIT(P) Capreomycin Sulfate
2-溴-3',5'-二氟苯乙酮山竹果標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 MANGOSTEEN STANDARDS KIT(P) Capreomycin Sulfate
1-芐基哌啶-2-羧酸木蘭亞屬標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 MAGNOLIA STANDARDS KIT(P) Carisoprodol
吡啶并[3,4-D]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮瑪卡標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 MACA STANDARDS KIT(RG) Carisoprodol
5-氨基-4-氮雜吲哚地衣酸標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 LICHEN ACID STANDARDS KIT(RG) Carvedilol
1-Boc-2-羥甲基哌洋地黃毛花苷標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 DIGITALIS LANATOSIDE STANDARDS KIT(RG) Carvedilol
1H-1,2,3-三氮唑-4-鹽酸鹽葛藤類黃酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 KUDZU FLAVONOID STANDARDS KIT(P) Cediranib
咪唑[1,2-a]吡啶-2-葛藤類黃酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 KUDZU FLAVONOID STANDARDS KIT(P) Celecoxib
5-羥基-3-甲基吲哚醉椒標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 KAVA STANDARDS KIT(P) Celecoxib
康力龍醉椒標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 KAVA STANDARDS KIT(P) Chlortetracycline HCl
2-氯-4-氯甲基吡啶黃連標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 KATUKA (PICRORHIZA KURROA) STANDARDS KIT(SH) Chlortetracycline HCl
4-溴-2-氟苯鹽酸鹽黃連標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 KATUKA (PICRORHIZA KURROA) STANDARDS KIT(SH) Cilostazol
不動(dòng)桿菌屬通用探針法PCR熒光定量試劑盒睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸金剛烷 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸金剛烷 質(zhì)量規(guī)格：純度>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)100mL
α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸金剛烷 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸金剛烷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：945-1030 ug /mg,二水物100mL
內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸,硫酸丁 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定100mL
嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸,硫酸丁 質(zhì)量規(guī)格：> 95%,BR100mL
嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸,硫酸丁 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硫酸(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)100ml
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