公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63743 |
細(xì)胞名稱 胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法（-）
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Kayaflavone
CAS No.：481-45-8
中文名：榧黃素
分子式：C33H24O10
黨參 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM) 規(guī)格： 0.5g
訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤衍生亮拉鏈額外核因子(MLZE) 規(guī)格： 100mg
（牛血） 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤缺乏因子1(AIM1) 規(guī)格： 150BP 單位/支
榧子 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤缺乏因子2(AIM2) 規(guī)格： 3g
長(zhǎng)梗冬青苷 訂購(gòu)|咨詢 鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B) 規(guī)格： 20mg
對(duì)基水楊 訂購(gòu)|咨詢 鋅指同源框蛋白4(ZFHX4) 規(guī)格： 100mg
連翹酯苷B 訂購(gòu)|咨詢 鋅結(jié)合α2糖蛋白1(αZGP1) 規(guī)格： 20mg
木通苷B（荷苞花苷B） 訂購(gòu)|咨詢 鋅結(jié)合α2糖蛋白1(αZGP1) 規(guī)格： 20mg/支
糠 訂購(gòu)|咨詢 短蛋白聚糖(BCAN) 規(guī)格： 20mg
亞藍(lán) 訂購(gòu)|咨詢 短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白2(SPLUNC2) 規(guī)格： 250mg
前列腺素B1 訂購(gòu)|咨詢 短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白3(SPLUNC3) 規(guī)格： 見標(biāo)示量
地瓜藤 訂購(gòu)|咨詢 物細(xì)胞內(nèi)通道蛋白1(CLIC1) 規(guī)格： 1g
卡前列酯 訂購(gòu)|咨詢 離子通道輔助蛋白1(CLCA1) 規(guī)格： 30mg
阿利坦酯混合物 訂購(gòu)|咨詢 筑絲蛋白1(TEKT1) 規(guī)格： 20mg
馬來依那普利 訂購(gòu)|咨詢 筑絲蛋白3(TEKT3) 規(guī)格： 100mg
毛兩面針?biāo)?/font> 訂購(gòu)|咨詢 筑絲蛋白4(TEKT4) 規(guī)格： 20mg
2基4 訂購(gòu)|咨詢 筑絲蛋白5(TEKT5) 規(guī)格： 50mg
土 訂購(gòu)|咨詢 集鈣蛋白(CASQ) 規(guī)格： 200mg
PDCD2L/MGC13096 程序性細(xì)胞死亡2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester
SLTM 轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)
GPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sulfameter
AX2R/LOC389289 膜粘連蛋白2受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Amitraz
NADE/NGFRAP1 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Amitraz
NRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Citric acid monohydrate
PGRPS 肽聚糖識(shí)別蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Salubrinal
Porimin 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Primaquine phosphate
真空油脂III 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:GreaseofhightemperatureIII 含量:2.5N，200目
真那氏綠 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:JanuˊsgreenB 含量:超純，99%
正丁 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Sodiumbutyrate 含量:CP，98%
正丁異戊酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Isoamylbutyrate 含量:色標(biāo)
正二十八 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Octacosane 含量:AR，99%
正二十七 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Heptacosane 含量:AR，99%
正釩 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Sodiumorthovanadate 含量:CP
正 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:TSP 含量:特純，98%
正硼 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Boricacid 含量:高純，98%
正三十六 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Hexatriacontane 含量:AR，39%
胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES醛類中和劑管規(guī)格：9ml*20支/包用途：用于消劑的中和
Half-Fraser培養(yǎng)基顆粒規(guī)格：225ml/袋*10用途：用于李氏菌的增菌培養(yǎng)
CC瓊脂添加劑規(guī)格：1ml/支*5用途：添加于CC瓊脂中
霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液（缺磷）規(guī)格：250g用途：用于植物無土栽培營(yíng)養(yǎng)液。
藥敏紙片規(guī)格：5ug/片，20片/瓶用途：
玫瑰紅鈉瓊脂平板（9cm）規(guī)格：10個(gè)/包用途：用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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